МОДЕРНИЗАЦИЯ ЭТАПОВ ТЕХНОЛОГИИ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГО СОЗРЕВАНИЯ ДОНОРСКИХ ООЦИТОВ BOS TAURUS

Авторы

  • Татьяна Ивановна Кузьмина Всероссийский научно-исследовательский институт генетики и разведения сельскохозяйственных животных
  • Алексей Вячеславович Молчанов Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И.Вавилова"
  • Диана Николаевна Татарская Международный Центр Репродуктивной медицины
  • Татьяна Ивановна Станиславович Всероссийский научно-исследовательский институт генетики и разведения сельскохозяйственных животных

DOI:

https://doi.org/10.28983/asj.v0i3.43

Ключевые слова:

ооцит, пролактин, кумулюс, пикноз, Bos taurus, бриллиантовый кристаллический голубой, эмбрион

Аннотация

Базовый метод инновационных клеточных репродуктивных технологий (получение эмбрионов in vitro, клонирование, трансгенез) – экстракорпоральное созревание донорских ооцитов. Оценка качества ооцитов и совершенствование сред для созревания являются одними из важнейших задач эмбриотехнологов. В данном исследовании на основе сравнительного комплексного анализа морфологии кумулюса и хроматина ооцитов (стадии мейоза и деструктивные изменения) проанализированы потенции к созреванию ооцитов в зависимости от их функционального статуса (растущие или завершившие фазу роста). ВСВ-диагностику, основанную на различии в окраске ооплазмы после воздействия витального красителя бриллиантового кристаллического голубого, использовали для определения функционального статуса ооцитов. Прослежена динамика преобразования хроматина при мейотическом созревании ооцитов контрольной группы и ооцитов в различном функциональном состоянии. Полученные данные свидетельствуют о возможности ооцитов, не завершивших фазу роста in vivo, при пролонгировании времени культивирования завершить ядерное созревание in vitro. В исследуемых группах не обнаружено достоверных различий в доле дегенерированных ооцитов в процессе культивирования вплоть до 30 ч. Предложена система для созревания in vitro ооцитов коров, предварительно тестированных на основе ВСВ-диагностики как не завершивших фазу роста in vivo, позволяющая увеличивать выход эмбрионов при оплодотворении in vitro до 38 %. Эффект достигается введением в среду дозревания 50 нг/мл пролактина, сменой среды через 15 ч от начала культивирования с добавлением 10 МЕ/мл хорионического гонадотропина человека и увеличением времени инкубирования до 30 ч.

Скачивания

Данные скачивания пока недоступны.

Биографии авторов

Татьяна Ивановна Кузьмина, Всероссийский научно-исследовательский институт генетики и разведения сельскохозяйственных животных

д-р биол. наук, проф., зав. лабораторией биологии развития, Всероссийский научно-исследовательский институт генетики и разведения сельскохозяйственных животных. Россия.

Алексей Вячеславович Молчанов, Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И.Вавилова"

д-р с.-х. наук, проф., зав. кафедрой «Технология производства и переработки продукции и животноводства», Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И. Вавилова». Россия.

Диана Николаевна Татарская, Международный Центр Репродуктивной медицины

врач-репродуктолог, Международный Центр Репродуктивной медицины. Россия.

Татьяна Ивановна Станиславович, Всероссийский научно-исследовательский институт генетики и разведения сельскохозяйственных животных

канд. с.-х. наук, ведущий научный сотрудник лаборатории биологии развития, Всероссийский научно-исследовательский институт генетики и разведения сельскохозяйственных животных. Россия.

Библиографические ссылки

1. Alm H., Torner H., Lohrke B. et al. Bovine blastocyst development rate in vitro is influenced by selection of oocytes by brillantcresyl blue staining before IVM as indicator for glucose-6-phosphate dehydrogenase activity // Theriogenology, 2005, Vol. 63, P. 2194–2205.
2. Andrew W, Taylor-Robinsonand and Van Huong
Do. Recent developments in in vitro fertilization technologies
in livestock // Avid Science, 2016, Vol. 1, P. 3– 30.
3. Bhojwani S., Alm H., Torner H., Kanitz W., Poehland R. Selection of developmentally competent oocytes through brilliant cresyl blue stain enhances blastocyst development rate after bovine nuclear transfer // Theriogenology, 2007, Vol. 67, P. 341.
4. CoticchioG., CantoM. D., Renzini M. M. et al. Oocyte maturation: gamete-somatic cells interactions, meiotic resumption, cytoskeletal dynamics and cytoplasmic reorganization // Hum Reprod Update, 2015, Vol. 21(4), P. 427–454.
5. Eppig J.J., Wigglesworth K., Pendola F.L. The mammalian oocyte orchestrates the rate of ovarian follicular development // Developmental Biology, 2002, Vol. 99, No. 5, P. 2890–2894.
6. Go?mez E., Rodr??guez A., Munoz M., Caamano J.N., Hidalgo C.O., Mora?n E., N. Facal, D??ez C. Serum free embryo culture medium improves in vitro survival of bovine blastocysts to vitrification // Theriogenology, 2008, Vol. 69, P. 1013–1021.
7. Heleil B., Kuzmina T., Novikova N., Torner H. and Alm H. Effect of prolactin on Developmental Competence of Bovine Oocytes Selected by Brilliant Cresyl Blue Staining // Jornal of Reproduction and Infertility, 2010, No. 1, P. 01–07.
8. Parrish J.J. Bovine in vitro fertilization: in vitro oocyte maturation and sperm capacitation with heparin //Theriogenology, 2014; 81: 67–73.
9. Sato E. Intraovarian control of selective follicular growth and induction of oocyte maturation in mammals // Proc. Jpn. Acad., 2015. – Vol. 91, P. 76–91.
10. Tarkowski A.K. An air-drying method for chromosomal preparation from mouse eggs // Cytogenetic, 1966, Vol. 1, P. 394–400.
11. ВСВ-диагностика донорских ооцитов Bos Taurusи SusScrofaDomesticus – перспективы использования в клеточных репродуктивных технологиях / Т.И. Кузьмина [и др.] // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. – 2015. – № 2. – С. 212–214.
12. Кузьмина Т.И., Торнер Х., Альм Х. Инновационные эмбриотехнологии в репродукции животных: от фундаментальных исследований к практике // Достижения науки и техники АПК. – 2010. – № 4. – С. 66–68.

Загрузки

Опубликован

2017-11-17

Выпуск

Раздел

Естественные науки

Наиболее читаемые статьи этого автора (авторов)

1 2 3 4 > >>